技术服务

全人源纳米抗体库定制

sdFv抗体介绍

抗体药物分子的研发,从最早期的全长单克隆抗体发展至今经历了多次的结构演变,诸如Fab,scFv,驼源VHH等,分子量从150kDa缩小为15kDa,以获取更好的渗透能力,适应更多的治疗机制需求,半衰期控制,双特异抗体设计等。

在多年的研发过程中,通过大量实验验证和项目经验,古格尔生物创新性的将天然人源的完整抗体,拆分为单个重链,单个轻链的新型抗体分子模式(结构类似VHH抗体),运用于噬菌体展示体系,构建了大容量的SdFv单结构域全人源抗体文库。VH、VK、VL可变区片段单独成库,更多的纳米类型,更广泛的抗体多样性。

 


工程抗体结构示例

sdFv的结构类似于驼源纳米抗体sdAb/VHH,由完整抗体拆分出来的可变区基因单独形成结构域,故称sdFv。


sdFv抗体特点

1. sdFv来源于天然全人源抗体序列,经历体内成熟过程,免疫原性极低。

2. sdFv分为3种类型,VH,VK,VL,多样性丰富。

3. 分子大小与驼源VHH纳米抗体相当,更强的渗透能力。

4. 单个可变区形成单结构域抗体,独特结构的表位的识别能力强于传统结构抗体。


文库案例

全人源抗体文库构建PCR扩增电泳展示

全人源PBMC总RNA提取


全人源sdFv抗体库构建第1轮PCR

调取扩增VH和VL基因片段


全人源sdFv抗体库构建第2轮PCR

sdFv文库构建1份PBMC可构建3种类型文库(VH、VK、VL)


序列分析


文库序列进化树及文库序列比对

sdFv抗体文库中VH多样性最高,VL多样性次之,VK多样性第三


技术服务流程

天然全人源sdFv抗体文库定制服务流程

服务流程

内容

周期

交付

沟通文库信息

确定文库多样性

文库库容大小

—

1.文库构建实验报告

(包含文库质量参数等文件)

2.抗体文库库容>1×109

3. 抗体文库总滴度>1×1014

4. 细菌库10ml

 

PBMC采集

客户提供PBMC

或古格尔提供

—

抗体文库构建

提取RNA

扩增抗体可变区片段

构建文库质粒

电击转化细菌

生产抗体文库

3周

文库质量检测

库容大小

文库滴度

插入率

测序分析序列多样性